PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- González E.T., Norimine J., Valera A.R., Travería G., Oliva G.A. & Etcheverrigaray M.E. 1999. A rapid and sensitive diagnosis of bovine leukaemia virus infection using the nested shuttle polyrnerase chain reaction. [Diagnóstico rápido e sensível da infecção com o vírus da Leucemia Bovina através de Shuttle Nested Polyrnerase Chain Reaction.] Pesquisa Veterinária Brasileira 19(2):63-67. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata, 60 y 118, 1900 La Plata, Argentina. Bovine leukaemia virus (BLV) is the causative agent of enzootic bovine leukosis (EBL). In Argentina, where a program to eradicate EBL has been introduced, sensitive and reliable diagnosis has attained high priority. Although the importance of the agar gel immunodiffusiontest remains unchanged for routine work, an additional diagnostic technique is necessary to confirm cases of sera with equivocal results or of calves carrying maternal antibodies. Utilizing a nested shuttle polymerase chain reaction, the provira) DNA was detected from cows experimentally infected with as little as 5 ml of whole blood from BLV seropositive cows that were nonetheless normal in haematological terms. It proved to be a very sensitive technique, since it rapidly revealed the presence of the proviras, frequently at 2 weeks postinoculation and using a two-round procedure of nested PCR taking only 3 hours. Additionally, the primers used flanked a portion of the viral genome often employed to differentiate BLV type applying BamHI digestion. It is concluded that this method might offer a highly promising diagnostic tool for BLV infection.

• Bovine Ieukaemia virus diagnosis Nested-PCR Leucose bovina diagnóstico.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- González E.T., Norimine J., Valera A.R., Travería G., Oliva G.A. & Etcheverrigaray M.E. 1999. A rapid and sensitive diagnosis of bovine leukaemia virus infection using the nested shuttle polyrnerase chain reaction. [Diagnóstico rápido e sensível da infecção com o vírus da Leucemia Bovina através de Shuttle Nested Polyrnerase Chain Reaction.] Pesquisa Veterinária Brasileira 19(2):63-67. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata, 60 y 118, 1900 La Plata, Argentina. Bovine leukaemia virus (BLV) is the causative agent of enzootic bovine leukosis (EBL). O Vírus da leucemia bovina (BLV) é o agente causal da Leucose Enzoótica Bovina (EBL). Na Argentina, iniciou-se um programa de erradicação da EBL. Neste estágio, é prioritário possuir uma ferramenta de diagnóstico confiável. Embora seja indiscutível a importância do teste de agar gel imunodifusão, empregado rotineiramente no diagnóstico serológico da EBL, faz-se necessária uma técnica de diagnóstico adicional capaz de confirmar os resultados duvidosos. Foi possivel detectar ADN provira) aplicando Nested-PCR em novilhos experimentalmente infectados com pequenas doses de sangue total (5ml) obtidas de um bovino BLV soropositivo. Esta técnica, cujo procedimento leva 3 horas, demonstrou ser muito sensível, uma vez que foi capaz de detectar a presença do proviras duas semanas após a inoculação. Os primers utilizados são os que detectam uma porção do genoma virai que geralmente é usado para diferenciar os tipos de BLV, utilizando a digestão com BamHI. Sugerimos que este método possa ser um instrumento válido para o diagnóstico precoce da infeção pelo BLv.